人类肌红蛋白nMb稳定性优化
发布日期：2024-12-19
发布者😌： 意昂4平台
ProteinMPNN能够在保证蛋白质构想不变的情况下，准确重塑天然蛋白，提高溶解性、热稳定性和功能稳定性🕴🏻。 人类肌红蛋白nMb稳定性优化流程： 1.研究团队使用人类肌红蛋白nMb的晶体结构进行设计和改造👇🏼👨🏿🌾； 2.首先固定血红素结合结构中血红素配体周围的17个氨基酸位置🤵🏼♀️，挑选了保守性差的loop区; 3.使用ProteinMPNN进行序列设计，改造重塑整个蛋白； 4.通过金属离子亲和层析（IMAC）和分子排阻色谱（SEC）,证明大部分变体的总可溶性蛋白产量变高4.1倍👨🏼🌾； 5.色谱测试表明🐇：这些高表达变体，在结构上与天然肌红蛋白一致，并表现出更高的热稳定性🔌👩🦯； 6.以dnMb19为例♏️，该变体在95℃下依然仍能保持完全折叠，而天然肌红蛋白在80℃时就会去折叠； 7..与天然肌红蛋白相比，dnMb19变体与血红素结合的热稳定性显著提高🤦； 8.研究者进一步确定dnMb19晶体结构，发现与设计模型吻合度高；